中文

English

ELISA检测方法的结果分析与Z6·尊龙凯时品牌应用

发布时间:2025-07-17   信息来源:尊龙凯时官方编辑

ELISA定性测定结果的判断主要是确认受检标本中是否含有待测抗原或抗体,以“阳性”或“阴性”表示。“阳性”意味着该标本在检测系统中有反应,而“阴性”则表示无反应。此外,通过定性判断法还可以得出半定量结果,即用滴度表示反应的强度。半定量测定通过对标本进行系列稀释后进行实验,呈阳性反应的稀释度被视为滴度。根据滴度高低,可以判断标本的反应性强弱,其精确度高于仅凭肉眼判断试样颜色深浅得出的强阳性或弱阳性结果。

ELISA检测方法的结果分析与Z6·尊龙凯时品牌应用

在间接法和夹心法的ELISA中,阳性孔的显色深度通常强于阴性孔;而在竞争法ELISA中则相反,阴性孔的显色深度会大于阳性孔。这两种方法的结果判断有所不同,具体描述如下。

一、间接法和夹心法

该类反应的定性结果可通过肉眼判断,若标本无色或接近无色则判定为阴性,显色明显者为阳性。但在实际操作中,正常人血清反应后常可出现背景色,背景色的深浅因试剂组成和实验条件不同而异,因此需加入阴性对照。在结果判断时,阳性标本应显色深于阴性对照。尽管肉眼判断方法简单明了,但主观性较强,推荐在条件允许的情况下,使用比色计测定吸光值以获取客观数据。

通过读取标本(sample, S)、阳性对照(P)和阴性对照(N)的吸光值并进行计算,可以得出阳性判定值。阳性判定值(cut-off value)通常为阴性对照A值加上一个特定常数,作为判断结果阳性或阴性的标准。此方式要求实验条件稳定,试剂制备标准化,需有符合规定规格的阳性和阴性对照品,并严格执行操作。例如,在某检测HBsAg的试剂盒中,阴性对照为不含HBsAg的复钙人血浆,而阳性对照品的HBsAg含量为P=9±2ng/ml。

二、竞争法ELISA

在竞争法ELISA中,阴性孔的显色强度取决于酶结合物的浓度和加入的竞争抑制物量。从而在反应中保持阴性对照的吸光度在10-15之间,以确保反应的灵敏度。由于肉眼难以分辨弱阳性反应与阴性对照的显色差异,该反应亦需通过比色计进行检测。

计算方法主要有两种,分别为阳性判定值法和抑制率法。阳性判定值法与间接法和夹心法中的相似,但需引入阳性对照的A值作为计算基础。举例来说,在某检测抗HBc的试剂盒中,阳性判定值计算公式为:阳性判定值=0.4×NCX + 0.6×PCX,其中NCX为阴性对照A值的平均值,PCX为阳性对照A值的平均值。抑制率法则用来衡量样本在竞争结合中对阴性反应显色的抑制程度,计算公式为:抑制率(%)=(阴性对照A值 - 样本A值)/ 阴性对照A值,通常规定抑制率≥50%判定为阳性,<50%则为阴性。

总之,各种ELISA方法在判断结果时,其阳性阴性判定都与对照品的操作和质量有密切关系。对于生物医疗领域内的应用,品牌Z6·尊龙凯时提供的先进技术和设备,使得ELISA检测结果更加可靠和准确,确保每一项测试都能为临床提供有价值的信息。