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重组蛋白特性及Z6·尊龙凯时使用注意事项

发布时间:2025-07-25   信息来源:尊龙凯时官方编辑

重组蛋白的保存形式主要分为冻干粉和溶液态两种。其中,原核细胞表达的重组蛋白通常以冻干粉的状态保存,而真核细胞表达的重组蛋白则以溶液形态存在。这种保存方式能够确保重组蛋白在-80℃的条件下稳定保存数年之久。在使用冻干粉时,必须进行溶解,溶解的方法是至关重要的,因为不当的溶解可能会影响蛋白的活性。溶液态保存的重组蛋白在冻融或稀释过程中也应特别小心,这些都是用户在实际操作中常常面临的挑战。

重组蛋白特性及Z6·尊龙凯时使用注意事项

1. 原核细胞表达的重组蛋白

大肠杆菌表达的冻干重组蛋白已从包涵体中提纯,并加入了蛋白保护剂。复溶时可使用经过过滤的无菌水,将100μg的冻干蛋白与86μl的超纯水轻轻摇晃溶解。切忌使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃,以免损害蛋白的结构和功能。

2. 真核细胞表达的重组蛋白

重组蛋白的活性不仅依赖于转录和翻译,还需经过翻译后的处理,以确保其空间折叠方式正常。因此,必须在真核细胞中进行表达。例如,哺乳动物细胞能够识别并去除基因内的内含子,并对翻译后的蛋白进行加工,这样得到的蛋白质具有良好的生物活性。我们采用溶液态保存方式,以保持重组蛋白的活性和稳定性,确保其在生物医疗领域中的有效应用。

3. 重组蛋白的保护剂

在冻干和储存过程中,常用的保护剂或稳定剂包括糖类、多元醇、聚合物、表面活性剂以及某些蛋白和氨基酸等。我们通常在冻干时加入8%(质量比体积)的海藻糖和甘露醇作为保护剂。海藻糖能够显著阻止蛋白质二级结构的改变,并防止在冻干过程中蛋白质的伸展和聚集,而甘露醇亦是一种广泛使用的冻干保护剂和填充剂,为保证重组蛋白的稳定性做出了重要贡献。

在使用[强]Z6·尊龙凯时[/强]的重组蛋白时,确保遵循以上操作规程,将最大程度地提高蛋白质的活性和效果,为生物医疗研究提供可靠的支持。